分散酶Dispase II
- 起訂量 (瓶)價格
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1-10¥2600 /瓶
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≥10¥680 /瓶
- 發布日期: 2020-12-25
- 更新日期: 2025-08-11
產品詳請
產地 |
國產
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品牌 |
聯祖
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貨號 |
LZ-PYJ4995
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用途 |
僅供科研研究實驗
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包裝規格 |
100mg
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CAS編號 |
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純度 |
%
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是否進口 |
否
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產品名稱:分散酶Dispase II
貨號:LZ-PYJ4995
規格 100 mg / 1 g
比活性(Specific Activity) ≥0.8 U/mg (+37℃, casein as substrate, pH 7.5)
單位定義(Unit Definition) 在溫度37℃、pH值為7.5的條件下,每分鐘水解酪蛋白釋放出相當于1 μM(181 μg)酪氨酸的福林陽性氨基酸和肽所需要的酶量,即為一個蛋白酶活性單位,以U表示。
pH(pH Optimum) 6.0-8.5
抑制劑(Inhibitors) EDTA, EGTA, Hg2+, 其他金屬離子。血清不會抑制dispase活性。
激活劑(Activator) Ca2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+,Al3+。的Ca2+濃度為2 mM。本酶制品已含足量的Ca2+使其處于活性。
產品特性
1) EC NO:3.4.24.4
2) 同義名:Neutral protease中性蛋白mei
3) 比活力:≥0.8 U/mg protein (37℃, casein as substrate, pH 7.5)
4) 酶活力單位定義:在37℃,pH 7.5的反應條件下,1min內釋放福林酚陽性反應氨基酸和多肽量相當于1 μmol (181 μg)酪氨suan所需的酶量即為一個活力單位。
5) pH:6.0 - 8.5
6) 激活劑:Ca2+為2mM,該酶已含足量Ca2+確保酶活力。
7) 抑制劑: EDTA, EGTA, Hg2+,以及其他重金屬。該酶活性不受血清干擾
使用方法
一、儲存液和工作液制備
1)儲存液制備:用Hepe緩沖鹽溶液(50 mM Hepes/KOH pH7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase II凍干粉,配制成10mg/ml的儲存液,用0.22μM濾膜過濾除菌。本儲存液置于2-8℃,2周穩定;根據單次用量分裝凍存,高達2個月穩定,避免反復凍融。
2)工作液制備:使用時用合適的細胞培養液將儲存液稀釋到工作液濃度即可,常用工作濃度為0.6-2.4 U/ml。不推薦使用>2.4 U/ml的工作濃度。具體使用濃度請根據自身實驗體系或參考文獻來調整。
組織分離
1)用無菌手術刀或剪刀將組織切成3-4mm小片,之后用無菌PBS緩沖液清洗組織片幾次;
2)用Dispase II工作液(0.6-2.4 U/ml)浸沒并37℃孵育進行組織解離;
3)置于水平搖床上,低速轉動,37℃孵育直至組織完quan解離;【注意】:次使用Dispase II,通過細胞計數來確定總反應時間。對于堅硬致密組織需要1h的孵育時間,不過孵育時間幾小時也不會有副作用。
4)若有需要,將消化產物用無菌不銹鋼網過篩,從而分離解散細胞和殘留組織,或當更大片段組織靜置到管底,輕輕倒出上層細胞。若需要進一步解離,則加入新鮮的Dispase II工作液到殘留組織。
5)低速離心收集細胞,吸掉酶工作液;
6)用適當的細胞培養液重懸細胞,置于正常預優化條件下培養。
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