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大鼠1,5-AG試劑盒 1,5-脫水山梨 elisa Kit實(shí)驗(yàn)原理

發(fā)表時(shí)間:2023-11-20
大鼠1,5-AG試劑盒 1,5-脫水山梨 elisa Kit實(shí)驗(yàn)原理:

大鼠1,5-AG試劑盒 1,5-脫水山梨 elisa Kit是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被1,5-脫水山梨捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的細(xì)1,5-脫水山梨呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。


ELIS試劑盒檢測(cè)過程中的注意事項(xiàng):

液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。


洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。對(duì)結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
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