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人WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1ELISA試劑盒操作步驟

發(fā)表時(shí)間:2021-10-28
人WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體
腦鈉通道蛋白1抗體
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體
甲胎蛋白抗體
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體
酸性鈣調(diào)蛋白3抗體
磷酸化CD156b抗體
乙醇脫氫酶5抗體
乙醇脫氫酶6抗體
溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶5抗體
遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體
免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
乙醛脫氫酶2型抗體
γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體
衰老相關(guān)蛋白5抗體
磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體
釉基質(zhì)蛋白抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白抗體
膜粘連蛋白11抗體
膜粘連蛋白13抗體
磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體


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