豬端粒酶（TE）ELISA檢測試劑盒通過雙抗體夾心法實現高特異性定量檢測。其核心在于利用抗豬TE單克隆抗體包被微孔板，形成固相捕獲體系。當樣本中的TE與包被抗體結合后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體，形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。通過TMB底物顯色反應，最終在450nm波長下測定吸光度值，其強度與TE濃度呈正相關。

檢測原理

?雙抗體夾心法?
采用捕獲抗體（包被在微孔板）和檢測抗體（酶標記）雙重識別端粒酶催化亞基TERT，通過夾心結構提高特異性?。

典型反應鏈：固相抗體-TERT-酶標抗體-底物顯色，顯色強度與TERT濃度正相關?。

?熒光定量PCR輔助驗證?

部分試劑盒結合qPCR技術，通過TaqMan探針法檢測TERT基因表達量（FAM/Cy5雙通道），以ΔΔCT法實現絕對定量?。

技術特點
?高靈敏度?：可檢測pg/mL級端粒酶活性，雙色探針設計降低背景干擾?
?種屬通用性?：適用于豬、大鼠、豚鼠等多種動物樣本（血清/組織裂解液）?
?標準化操作?：全程閉管反應，避免交叉污染，含內參基因（如GAPDH）校正假陰性?
三、操作流程
?樣本處理?：Trizol法提取RNA，逆轉錄為cDNA?
?ELISA反應?：
包被抗體孵育（4℃過夜）
加入待測樣本及酶標二抗（37℃ 1h）
TMB底物顯色（OD450nm讀數）?
?數據分析?：標準曲線法計算TERT濃度?
四、注意事項
?樣本保存?：血清需-20℃凍存，避免反復凍融?
?質控要求?：設置陽性（293T細胞）和陰性（MRC-5細胞）對照?。
?干擾因素?：溶血樣本可能影響結果準確性?。