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上海聯祖生物科技有限公司
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MAMDC2蛋白抗體分子標記技術

發表時間:2023-07-20
MAMDC2蛋白抗體分子標記技術:

(一)原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

(二)準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;

(三)操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

Southern Marker DL2000(DIG)(見關聯產品)
Southern Marker DL2000(生物素)(見關聯產品)
Southern Marker Oligo(DIG)(見關聯產品)
Southern Marker Oligo(生物素)(見關聯產品)
Southern專用DNA Marker(DIG)
Southern專用DNA Marker(生物素)
超螺旋DNA分子量標準(DNA marker)
大片段DNA分子量標準(DNA marker)
脈沖電泳Marker(低范圍PFG)(見關聯產品)(停產)
脈沖電泳Marker(Lambda LadderPFG)(見關聯產品)
脈沖電泳Marker(酵母染色體PFG)(見關聯產品)(停產)
核酸沉淀劑及助沉劑
Acryl DNA助沉劑(1 mL)
彩色Acryl DNA助沉劑(1 g)(停產)
超快非醇核酸沉淀劑(100次)
超快非醇核酸沉淀劑(30次)
分子生物學級糖原干粉(1g)
分子生物學級糖原溶液(1mL)
天凈沙核酸濃縮劑
微量DNA助沉劑
微量RNA助沉劑
微量核酸沉淀劑
核酸純化
96孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)(1次)
96孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)(5次)
96孔板PCR片段純化回收試劑盒(真空法)(見關聯產品)
低載量PCR片段純化試劑盒(100次)


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