大鼠角膜上皮細胞作為眼科研究的重要模型，其來源與特性直接影響實驗結果的可靠性。目前實驗室常用的獲取途徑主要包括以下三種：  

1. 原代培養法
通過手術分離大鼠角膜上皮層，采用酶消化（如胰蛋白酶或膠原酶）結合機械刮取法獲得單細胞懸液。該方法能保留細胞的天然特性，但操作繁瑣且易受污染，需嚴格控制消化時間以避免細胞損傷。  
 2. 永生化細胞系
通過基因轉染（如SV40大T抗原）建立永生化角膜上皮細胞系，可長期傳代并保持增殖能力，適用于高通量實驗。但需注意其與原代細胞在代謝和分化潛能上的差異可能影響部分研究結論。  

3. 組織工程角膜模型
結合3D培養技術，將分離的角膜上皮細胞接種于脫細胞角膜基質或合成支架上，模擬體內微環境。此類模型更接近生理狀態，可用于藥物滲透性或創傷修復研究，但成本較高且技術門檻大。  

應用與挑戰
這些細胞在干眼癥機制、角膜創傷修復及毒性測試中廣泛應用，但需根據實驗目的權衡來源的優劣。例如，原代細胞適合短期基因表達分析，而永生化細胞更適用于需要穩定增殖的長期實驗。未來，類器官技術和無血清培養體系的優化有望進一步提升角膜上皮細胞的實驗相關性。