小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0提取物細胞處理：

1)復蘇細抱:將會有1mL細胞液的凍存管迅速放入37て水浴中(水回要低于存管蓋部)見解點,移入事先準好的含有4mL培養

基的15ml高心管中混合均勻。在1000RPM條件下高心4分鐘,棄云上清液,加入1mlL培養基后吹勻。然后將所有細抱懸液移入?有5ml

培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并查細密度。

2）細胞,傳代可參考以下方法

方法一:收集細抱,1000RPM,常條件下離心5分鐘,?去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細長液按1:2到1:5的比例分到

新的?8m培養基的新皿中或者瓶中

方法ニ:可遠擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細抱懸起,將細抱懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8m培養基的新皿

或善瓶

3)細凍存:待細生長狀態良好

存上清液(防止細抱吸走),加入部分新年培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在東存管中加入10%DMSO勻后進行凍存。凍存

凍存細抱時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養基。

1)細抱凍存培養基是一種用于乳動物細的卻用型完全凍存培養基,其所含治牛血清和牛血清例經過優化,可改善細抱活力以及解

凍后的細抱復蘇效果。

2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無凍存培養基,?10%DMSO,適用于多種干細抱和原代抱(無色素細胞除外)的