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龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒實驗步驟

發(fā)表時間:2021-03-24
龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒實驗步驟:
①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)elisa檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)elisa檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)elisa檢測試劑盒
小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa檢測試劑盒
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小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)elisa檢測試劑盒
小鼠花生四烯酸12 - 脂氧合酶,12S型(Alox12/Alox12p)elisa檢測試劑盒


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