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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
公司動(dòng)態(tài)

層粘蛋白α5抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg的制備過(guò)程

發(fā)表時(shí)間:2022-04-11
層粘蛋白α5抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg的制備過(guò)程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,聯(lián)祖通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血,家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。

含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體
AGXT2L2蛋白抗體
β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體
腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體
腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
α1B糖蛋白抗體
載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
肌萎縮側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體
ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
肝素結(jié)合蛋白/陽(yáng)離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
核突觸蛋白抗體
β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體
激活素受體2A抗體
水通道蛋白5抗體
β淀粉樣肽(1-40)抗體


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