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超純RNA提取試劑盒(DNase I)實(shí)驗(yàn)步驟

發(fā)表時(shí)間:2022-06-08
超純RNA提取試劑盒(DNase I)實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解

(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))

人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA Kit,48T/96T 
人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA Kit,48T/96T 
犬α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
貓α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
人α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
猴α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
豬α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
兔子α干擾素(IFN-α)ELISA Kit,48T/96T 
人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA Kit,48T/96T 
人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA Kit,48T/96T 
人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA Kit,48T/96T 
人纖連蛋白(FN)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠纖連蛋白(FN)ELISA Kit,48T/96T 


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